氟乙酰胺類鼠藥三種檢驗(yàn)方法的改善

時(shí)間：2022-07-22 08:41:16 本科畢業(yè)醫(yī)學(xué)論文我要投稿

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氟乙酰胺類鼠藥三種常用檢驗(yàn)方法的改善

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　　【摘要】氟乙酰胺是一種速效、劇毒的殺鼠藥，由于其外形與堿面、食鹽極其相似，在市面上又極易獲得，因此經(jīng)常被用于投毒案中。中毒案件中的檢材大部分都是胃內(nèi)容、嘔吐物、飼料、飯菜等，檢材提取比較困難，容易對(duì)結(jié)果產(chǎn)生干擾。氟乙酰胺的快速檢驗(yàn)策略一直沒有統(tǒng)一的國家標(biāo)準(zhǔn)，而且?guī)追N常用的策略都分別有一定的局限性。因此針對(duì)常用的納氏試劑法、硫靛反應(yīng)薄層色譜法及異羥肟酸—鐵反應(yīng)薄層色譜法進(jìn)行相應(yīng)的分析改善，盡量減少漏檢誤判的情況，并提高檢出率。

　　【關(guān)鍵詞】氟乙酰胺;快速檢驗(yàn);納氏試劑法;薄層色譜法

　　氟乙酰胺又名敵蚜胺、氟素兒、毒頭王或1081，是一種無色、無臭、高效、劇毒(人的口服致死量為0.1～0.5g)的內(nèi)吸性二重類有機(jī)氟農(nóng)藥。50年代我國開始生產(chǎn)，原是一種高效、內(nèi)吸、長(zhǎng)效性的殺蟲、殺螨劑。能防治多種農(nóng)業(yè)害蟲，但因其毒性劇烈，二次中毒嚴(yán)重，70年代就被國家明令禁止生產(chǎn)和使用。又因其殺鼠效果極佳，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，成本低，目前仍有不少地下工廠私自違法生產(chǎn)，作為殺鼠劑投放市場(chǎng)。因氟乙酰胺外形與堿面、食鹽極其相似，在市面上又極易獲得，所以經(jīng)常被用于投毒案件中。由于氟乙酰胺提取劑的選擇和檢材的處理比較困難，故提取率和檢出靈敏度較低，易受雜質(zhì)干擾。本文對(duì)三種常用的策略進(jìn)行了比較分析，三種策略都各有利弊，經(jīng)過反復(fù)比較分析并做了相應(yīng)改善整理，現(xiàn)詳述如下，供大家在工作中參考。

　　1.中毒原理

　　氟乙酰胺進(jìn)入機(jī)體后，主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和糖代謝過程。口服氟乙酰胺經(jīng)胃酸作用水解脫氫生成氟乙酸，由于氟乙酸在細(xì)胞內(nèi)得以冒充乙酸進(jìn)行作用。氟乙酸與細(xì)胞內(nèi)線粒體的三磷酸腺苷和輔酶A結(jié)合，生成氟乙酰輔酶A，再與草酰乙酸縮合而成氟檸檬酸。氟檸檬酸與檸檬酸在化學(xué)結(jié)構(gòu)上相似。氟檸檬酸能與烏頭酸酶牢固結(jié)合而使酶失去活性，阻斷三羥酸循環(huán)中檸檬酸的氧化，使檸檬酸在組織中大量幾積聚，從而使機(jī)體代謝發(fā)生障礙。由于氟檸檬酸與烏頭酸酶的結(jié)合是不可逆的，所以這一過程被稱為“致死合成”。

　　2.檢驗(yàn)策略

　　2.1納氏試劑法

　　反應(yīng)原理：氟乙酰胺水溶液遇到強(qiáng)堿性的納氏試劑水解生成氫，與納氏試劑作用生成碳化氧二汞銨黃棕色沉淀。

　　FCH2CONH2+NaOH=FCH2COONa+NH3↑

　　NH3+2(KI)2HgI2+3OH=OHg2NH2I+4K+2H2O+7I↓

　　策略：將檢材加少許蒸餾水溶解，取水溶液10滴與小試管中，加堿性納氏試劑，放置片刻觀察結(jié)果。如果有氟乙酰胺存在，則會(huì)有下列呈色反應(yīng)：淡黃→亮黃→深黃→棕黃色沉淀。如果含量高，則會(huì)馬上變黃繼而出現(xiàn)棕黃色沉淀。同時(shí)做空白和陽性對(duì)照。

　　2.2薄層色譜法

　　2.2.1

　　反應(yīng)原理：氟乙酰胺與羥胺在堿性條件下，生成異羥肟酸，與三價(jià)鐵離子作用生成紫色異羥肟酸絡(luò)合物。

　　FCH2CONH2+NH2OH→FCH2CONHOH

　　FCH2CONHOH+FeCl3→(FCH2CONHO)3Fe

　　策略：取檢材提取液50ml濃縮成1ml，調(diào)節(jié)PH值為7.0，加10%氫氧化鈉和鹽酸羥胺溶液各0.5ml，置于60℃水浴中加熱8分鐘，取出放冷后加入5%鹽酸調(diào)至PH值為3，再加一滴1%三氯化鐵溶液，如有氟乙酰胺存在則顯紫紅色。同時(shí)做空白和陽性對(duì)照。

　　當(dāng)紫色異羥肟酸絡(luò)合物有雜質(zhì)掩蓋時(shí)，進(jìn)行薄層色譜分析。操作如下：用毛細(xì)管吸取濃縮后的異羥肟酸絡(luò)合物反應(yīng)層，在硅膠G薄層板上點(diǎn)樣，經(jīng)展開晾干后噴鹽酸羥胺—?dú)溲趸c溶液至薄層濕透，然后將薄層板置120℃烘箱中烘干，放冷后再噴三氯化鐵鹽酸溶液，并觀察反應(yīng)結(jié)果。

　　2.2.2

　　反應(yīng)原理：氟乙酰胺及其代謝酸在堿性條件下經(jīng)氧化生成可溶于氯仿的紅色硫靛。

　　策略：取檢材提取液1ml置于5ml小試管中，加硫代水楊酸試劑0.5ml，50%氫氧化鈉2滴搖勻，置于120℃烘箱中加熱至完全干燥，再置于150℃烘箱中加熱1小時(shí)反應(yīng)至出現(xiàn)白色或灰白色殘?jiān)〕龇爬洌诱麴s水1ml溶解后，加入數(shù)滴2%高鐵溶液，再加入1ml分析純氯仿振搖、靜置。同時(shí)做空白和陽性對(duì)照。

　　當(dāng)硫靛反應(yīng)現(xiàn)象不明顯時(shí)，同樣進(jìn)行薄層色譜分析。操作如下：厚度為0.3mm的硅膠G薄層板，置于120℃烘箱中活化半小時(shí)，取出放冷。用毛細(xì)管吸取濃縮后的硫靛反應(yīng)層，在薄層板上點(diǎn)樣。用分析純苯試劑展開10分鐘以上，并觀察反應(yīng)結(jié)果。

　　3.討論

　　中毒案件中檢材的來源基本是胃內(nèi)容、嘔吐物、飼料等，檢材經(jīng)過處理后，一般都有顏色干擾，所以必須要經(jīng)過活性炭進(jìn)行脫色處理。但是實(shí)際的投毒案例中，有時(shí)候可以利用的檢材數(shù)量并不多，并且還要剩余一部分檢材用以保存。那么就會(huì)遇到很現(xiàn)實(shí)的理由，如果利用活性炭多次脫色就會(huì)對(duì)檢材中分解的氨造成損失，如果造成漏檢就會(huì)造成無法彌補(bǔ)的損失。因此，在采用納氏試劑法時(shí)，檢材前處理尤其重要，應(yīng)充分利用氟乙酰胺在水中不穩(wěn)定，逐漸分解出氨的性質(zhì)，用水蒸汽蒸餾法將氨蒸出，達(dá)到富集被檢物的目的，這樣就大大提高了氟乙酰胺的檢出率，從而有效避開了誤判和漏檢的理由。

　　異羥肟酸—鐵反應(yīng)非常容易出現(xiàn)假陽性理由或假陰性理由，因此必須同時(shí)做陽性對(duì)照和空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)。同時(shí)檢材提取液煮沸濃縮后，應(yīng)將PH值調(diào)為7.0，并且注意添加鹽酸和氫氧化鈉的量要相等。只有這樣才能最大程度的減少雜質(zhì)和認(rèn)為因素的干擾，從而保證定性的準(zhǔn)確性。

　　異羥肟酸—鐵反應(yīng)物與硫靛反應(yīng)物的薄層色譜法靈敏度都很高，都可準(zhǔn)確定性，并具有檢出率高，不易受雜質(zhì)干擾的特性。同時(shí)，硫靛反應(yīng)產(chǎn)物非常穩(wěn)定，并且在波長(zhǎng)256nm、279nm、312nm及546nm處有吸收峰，因此可以用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行定量檢測(cè)。

　　氟乙酰胺的檢驗(yàn)?zāi)壳安o國家統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)分析策略，雖然以上所述化學(xué)策略具有簡(jiǎn)便、快捷，不需要借助專業(yè)的實(shí)驗(yàn)儀器的特點(diǎn)，但是靈敏度上還是達(dá)不到很高要求。因此只能應(yīng)用于含量較高的氟乙酰胺檢測(cè)中，如果條件允許，還是應(yīng)該采用色譜儀做進(jìn)一步對(duì)照確定。同時(shí)在中毒案件中，還可以參考中毒者的中毒癥狀等多方面考慮，盡量不出現(xiàn)漏檢或誤判的情況。

　　氟乙酰胺中毒的原因、癥狀是什么？如何防治？

　　氟乙酰胺是一種有機(jī)氟化合物，是一種應(yīng)用廣泛的殺蟲劑，有內(nèi)吸及觸殺作用。

　　【病因】

　　牛誤食噴灑了農(nóng)藥的飼草和被污染的飲水，氟乙酰胺進(jìn)入機(jī)體并轉(zhuǎn)變?yōu)槎拘愿蟮姆鷻幟仕幔?dāng)蓄積到一定量后出現(xiàn)癥狀。潛伏期為30分鐘至2小時(shí)。

　　【癥狀】

　　中毒主要表現(xiàn)為心血管系統(tǒng)反應(yīng)，精神沉郁，全身無力，不愿走動(dòng)，體溫正常或低于正常，反芻停止，食欲廢絕。心跳加快，心律不齊，脈搏弱，出現(xiàn)心室纖維性顫動(dòng)。磨牙、呻吟、不排糞、步態(tài)蹣跚，腦部缺氧，發(fā)生陣發(fā)性痙攣，病程持續(xù)2～3天。急性的持續(xù)9～18小時(shí)，突然倒地、抽搐、死亡，死前四肢痙攣，瞳孔放大，口吐白沫，角弓反張。

　　【防治】

　　（1）預(yù)防

　　加強(qiáng)有機(jī)氟化物的保管和使用，注意放牧?xí)r的飼草采食情況，做好毒物監(jiān)測(cè)，牧草氟含量高于30克/千克、飲水氟含量高于2克/千克時(shí)不可食（飲）。

　　（2）治療

　　①首先用0.02%高錳酸鉀溶液或石灰水洗胃，然后服蛋清或氫氧化鋁膠以保護(hù)胃腸黏膜，最后用鹽類瀉劑導(dǎo)瀉。

　　②肌內(nèi)注射解氟靈（50%乙酰胺），每千克體重0.1克，首次用量達(dá)到每日用藥量的一半，一般注射3～4次，直到顫搐現(xiàn)象消失。

　　③可用醋精（乙二醇乙酸酯）100毫升，溶于500毫升水中，口服，或以每千克體重0.125毫升肌內(nèi)注射；或用95%酒精100～200毫升，加適量水，每日口服1次；或用5%酒精和5%醋酸，每千克體重各2毫升，口服。

　　④進(jìn)行對(duì)癥治療。靜脈注射葡萄糖酸鈣有助于控制痙攣；鎮(zhèn)靜使用巴比妥、水合氯醛或氯丙嗪；解除呼吸抑制，可用山梗茶堿、可拉明；控制腦水腫，可用20%甘露醇（或25%山梨酸）溶液，也可靜脈注射50%葡萄糖溶液；糾正酸中毒，可用5%碳酸氫鈉溶液。

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