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脫敏組方抗Ⅰ型變態反應的實驗研究
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【摘要】 目的 觀察脫敏組方對Ⅰ型變態反應的影響，探討其抗變態反應的作用機制。方法 離體豚鼠回腸分別經組胺和肥大細胞脫顆粒劑compound 48/80致敏后，加入不同濃度(1.4、2.8 kg/L)的脫敏組方,記錄腸肌收縮的幅度。陽性對照藥物分別為氯雷他定和酮替芬。結果 脫敏組方低劑量組和高劑量組均可抑制組胺誘發的腸肌收縮(t=2.194、3.325,P<0.05)及compound 48/80誘發的腸肌收縮(t=2.314、3.455,P<0.05)。結論 中藥脫敏組方具有較好的抗Ⅰ型變態反應作用且具有量效依賴關系。
【關鍵詞】 脫敏組方;超敏反應;回腸;豚鼠
脫敏組方由甘草、苦參、生地、荊芥、丹皮等16 味中藥組成,臨床用于治療過敏性疾病取得了較好的療效。為探討其藥理作用機制,本實驗對脫敏組方抗Ⅰ型變態反應的藥理作用進行了研究,旨在為臨床應用提供實驗和理論依據,現將結果報告如下。
1 材料與方法
1.1 動物來源
豚鼠20只,體質量400～450 g,雌雄各半, 均由青島市動物實驗中心提供。
1.2 藥品與試劑
脫敏組方取自我院,按處方配齊藥物140 g,加入1 kg冷水泡1 h后，文火煎20 min，過濾，繼續用文火煎濾液至100 mL，即得含生藥1.4 kg/L的低劑量脫敏組方;相同方法煎濾液至50 mL，即得含生藥2.8 kg/L的高劑量脫敏組方。氯雷他定片由上海先靈葆雅制藥有限公司生產,批號：071039;酮替芬由山東省莒南制藥廠生產,批號：070101;Compound 48/80由SIGMA公司生產，批號：07093;組胺二磷酸鹽由上海麗珠東風生物技術有限公司生產，批號：071117, 其他試劑均為國產分析純。
1.3 儀器
XWT?464 型臺式自動平衡記錄儀(上海大華儀表廠)、 縱行玻璃恒溫灌流肌槽(天津)、JZ2BK肌肉張力換能器(貝科測定設備有限公司)
1.4 方法
豚鼠禁食24 h后擊其頭部使其昏迷, 剖開腹腔,以胃幽門與十二指腸交界處為起點,取20～30 cm的腸管,去除腸管的脂肪和腸系膜,用絲線結扎腸兩端,剪刀截取中間部分腸管,放入充氧的37 ℃臺氏液中漂洗干凈,將其截為2～3 cm長的腸段, 兩端結扎，一端系于通氣鉤上，另一端系于換能器上。置入盛有30 mL 臺氏液的恒溫平滑肌槽中水浴,保持槽內溫度恒定在37 ℃,通氧氣，調節充氧流量，以不影響腸肌的自由收縮為宜。給予標本1.0 g 的基礎負荷,采用等長收縮的形式,通過張力換能器輸入二道生理記錄儀。空白對照組:調節恒溫平滑肌槽內腸肌張力,待舒縮穩定后,描記2 min腸肌正常運動曲線, 測量腸肌收縮幅度值。組胺致敏組：在描記2 min腸肌正常運動曲線以后,加入0.2 mg/L的組胺溶液0.1 mL, 使回腸達到最大興奮性收縮,穩定后描記2 min運動曲線, 測量腸肌收縮幅度值。脫敏組方低劑量Ⅰ組: 在組胺致敏的基礎上再加入低濃度脫敏組方(1.4 kg/L)0.1 mL, 同時描記2 min穩定后的腸肌運動曲線，測量腸肌收縮幅度值。 脫敏組方高劑量Ⅰ組:腸肌收縮幅度值測量方法同低劑量Ⅰ組,但加入高濃度脫敏組方(2.8 kg/L)0.1 mL。氯雷他定組:方法同前, 加入的氯雷他定濃度為0.5 kg/L。 Compound 48/80致敏組：方法同前加入4.5 kg/L的Compound 48/80溶液0.1 mL。脫敏組方低劑量Ⅱ組: Compound 48/80致敏的基礎上，再加入低濃度的脫敏組方(1.4 kg/L)0.1 mL。脫敏組方高劑量Ⅱ組:方法同低劑量Ⅱ組, 加入高濃度脫敏組方(2.8 kg/L)0.1 mL。酮替芬組:方法同前, 加入的酮替芬濃度為0.4 kg/L。
2 結果
2.1 脫敏組方對組胺興奮離體回腸收縮幅度影響
本文空白對照組、組胺致敏組、脫敏組方低劑量Ⅰ組、脫敏組方高劑量Ⅰ組以及氯雷他定組的離體回腸收縮幅度分別為(11.45±0.75)、(29.05±0.35)、(14.75±0.67)、(12.54±0.94)、(12.31±0.61)mm。其中脫敏組方低劑量Ⅰ組、脫敏組方高劑量Ⅰ組、氯雷他定組的收縮幅度值較組胺致敏組降低(t=2.194～3.325，P<0.05), 脫敏組方高劑量Ⅰ組、氯雷他定組的收縮幅度值較脫敏組方低劑量Ⅰ組降低(t=3.780、3.561，P<0.05),脫敏組方高劑量Ⅰ組與氯雷他定組收縮幅度值比較無統計學意義(t=1.835，P>0.05)。
2.2 脫敏組方對Compound 48/80興奮離體回腸收縮幅度的影響
Compound 48/80致敏組、脫敏組方低劑量Ⅱ組、脫敏組方高劑量Ⅱ組及酮替芬組的離體回腸收縮幅度值分別為(31.15±0.65)、(15.01±0.73)、(12.77±0.79)、(12.89±1.16) mm。其中脫敏組方低劑量Ⅱ組、脫敏組方高劑量Ⅱ組以及酮替芬組的收縮幅度值均較Compound 48/80致敏組降低(t=2.314～3.455，P<0.05), 脫敏組方高劑量Ⅱ組、酮替芬組較脫敏組方低劑量Ⅱ組均降低(t=3.169、3.075，P<0.05),脫敏組方高劑量Ⅱ組與酮替芬組比較無顯著性(t=1.976，P>0.05)。
3 討論
Ⅰ型變態反應又稱Ⅰ型超敏反應,是IgE 抗體介導的速發型變態反應，在臨床上比較常見。組胺的受體分型有3類：H1和H2受體分布于中樞組胺能神經元及外周的胃腸、氣管、子宮、血管平滑肌等組織中，H3受體主要分布于中樞組胺能神經元內，在外周組織分布密度較低[1]。組胺能引起血管擴張，通透性增加[2]。本文結果顯示，脫敏組方高劑量Ⅰ組對組胺引起的回腸收縮的抑制作用與氯雷他定組相當，脫敏組方低劑量Ⅰ組的作用強度弱于氯雷他定組。說明脫敏組方通過競爭性結合組胺受體，從而拮抗組胺作用于相應靶器官所引起的一系列炎癥效應，且具有量效依賴關系。
Compound 48/80為N?甲氧苯胺和甲醛的縮合物，作為一種非特異性觸發劑，它作用于細胞膜上相應的受體，通過改變肥大細胞膜的通透性或其他機制誘導組胺等過敏遞質的釋放。本文結果顯示，脫敏組方高劑量Ⅱ組對Compound 48/80引起的回腸收縮的抑制作用與酮替芬組相當，脫敏組方低劑量Ⅱ組的作用強度弱于酮替芬組。說明脫敏組方可以通過減少非特異性抗原Compound 48/80直接誘導的肥大細胞釋放組胺來發揮抗過敏反應的作用，且具有量效依賴關系。
中藥復方制劑脫敏組方臨床上用于治療蕁麻疹、濕疹等變態反應性皮膚病取得較好的效果。此方中甘草的有效成分甘草甜素有抗過敏、抑制肥大細胞脫顆粒的作用,對補體的兩條激活途徑都有抑制作用。甘草根莖及糖甙有抗乙酰膽堿和組胺的作用,還有糖皮質激素樣作用。苦參中的氧化苦參堿具有明顯抑制變應原誘導的肥大細胞脫顆粒作用,能降低細胞膜的流動性,穩定細胞膜。
綜上所述,由這些藥物組成的脫敏方劑具有抗Ⅰ型變態反應的藥理作用，可在臨床上推廣應用。
【參考文獻】
[1]匡榮,安寧飛,劉玉蘭. 組胺研究進展[J]. 中國藥理學通報, 2000,16(15):501?503.
[2]李俠. 三聯療法治療慢性蕁麻疹86 例臨床分析[J]. 青島大學醫學院學報, 2007,43(6):544.
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