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脫敏組方抗Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】 目的 觀察脫敏組方對(duì)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的影響，探討其抗變態(tài)反應(yīng)的作用機(jī)制。方法 離體豚鼠回腸分別經(jīng)組胺和肥大細(xì)胞脫顆粒劑compound 48/80致敏后，加入不同濃度(1.4、2.8 kg/L)的脫敏組方,記錄腸肌收縮的幅度。陽(yáng)性對(duì)照藥物分別為氯雷他定和酮替芬。結(jié)果 脫敏組方低劑量組和高劑量組均可抑制組胺誘發(fā)的腸肌收縮(t=2.194、3.325,P<0.05)及compound 48/80誘發(fā)的腸肌收縮(t=2.314、3.455,P<0.05)。結(jié)論 中藥脫敏組方具有較好的抗Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)作用且具有量效依賴(lài)關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】 脫敏組方;超敏反應(yīng);回腸;豚鼠
脫敏組方由甘草、苦參、生地、荊芥、丹皮等16 味中藥組成,臨床用于治療過(guò)敏性疾病取得了較好的療效。為探討其藥理作用機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)對(duì)脫敏組方抗Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的藥理作用進(jìn)行了研究,旨在為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù),現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1 材料與方法
1.1 動(dòng)物來(lái)源
豚鼠20只,體質(zhì)量400～450 g,雌雄各半, 均由青島市動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
1.2 藥品與試劑
脫敏組方取自我院,按處方配齊藥物140 g,加入1 kg冷水泡1 h后，文火煎20 min，過(guò)濾，繼續(xù)用文火煎濾液至100 mL，即得含生藥1.4 kg/L的低劑量脫敏組方;相同方法煎濾液至50 mL，即得含生藥2.8 kg/L的高劑量脫敏組方。氯雷他定片由上海先靈葆雅制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)：071039;酮替芬由山東省莒南制藥廠生產(chǎn),批號(hào)：070101;Compound 48/80由SIGMA公司生產(chǎn)，批號(hào)：07093;組胺二磷酸鹽由上海麗珠東風(fēng)生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：071117, 其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
1.3 儀器
XWT?464 型臺(tái)式自動(dòng)平衡記錄儀(上海大華儀表廠)、 縱行玻璃恒溫灌流肌槽(天津)、JZ2BK肌肉張力換能器(貝科測(cè)定設(shè)備有限公司)
1.4 方法
豚鼠禁食24 h后擊其頭部使其昏迷, 剖開(kāi)腹腔,以胃幽門(mén)與十二指腸交界處為起點(diǎn),取20～30 cm的腸管,去除腸管的脂肪和腸系膜,用絲線結(jié)扎腸兩端,剪刀截取中間部分腸管,放入充氧的37 ℃臺(tái)氏液中漂洗干凈,將其截為2～3 cm長(zhǎng)的腸段, 兩端結(jié)扎，一端系于通氣鉤上，另一端系于換能器上。置入盛有30 mL 臺(tái)氏液的恒溫平滑肌槽中水浴,保持槽內(nèi)溫度恒定在37 ℃,通氧氣，調(diào)節(jié)充氧流量，以不影響腸肌的自由收縮為宜。給予標(biāo)本1.0 g 的基礎(chǔ)負(fù)荷,采用等長(zhǎng)收縮的形式,通過(guò)張力換能器輸入二道生理記錄儀。空白對(duì)照組:調(diào)節(jié)恒溫平滑肌槽內(nèi)腸肌張力,待舒縮穩(wěn)定后,描記2 min腸肌正常運(yùn)動(dòng)曲線, 測(cè)量腸肌收縮幅度值。組胺致敏組：在描記2 min腸肌正常運(yùn)動(dòng)曲線以后,加入0.2 mg/L的組胺溶液0.1 mL, 使回腸達(dá)到最大興奮性收縮,穩(wěn)定后描記2 min運(yùn)動(dòng)曲線, 測(cè)量腸肌收縮幅度值。脫敏組方低劑量Ⅰ組: 在組胺致敏的基礎(chǔ)上再加入低濃度脫敏組方(1.4 kg/L)0.1 mL, 同時(shí)描記2 min穩(wěn)定后的腸肌運(yùn)動(dòng)曲線，測(cè)量腸肌收縮幅度值。 脫敏組方高劑量Ⅰ組:腸肌收縮幅度值測(cè)量方法同低劑量Ⅰ組,但加入高濃度脫敏組方(2.8 kg/L)0.1 mL。氯雷他定組:方法同前, 加入的氯雷他定濃度為0.5 kg/L。 Compound 48/80致敏組：方法同前加入4.5 kg/L的Compound 48/80溶液0.1 mL。脫敏組方低劑量Ⅱ組: Compound 48/80致敏的基礎(chǔ)上，再加入低濃度的脫敏組方(1.4 kg/L)0.1 mL。脫敏組方高劑量Ⅱ組:方法同低劑量Ⅱ組, 加入高濃度脫敏組方(2.8 kg/L)0.1 mL。酮替芬組:方法同前, 加入的酮替芬濃度為0.4 kg/L。
2 結(jié)果
2.1 脫敏組方對(duì)組胺興奮離體回腸收縮幅度影響
本文空白對(duì)照組、組胺致敏組、脫敏組方低劑量Ⅰ組、脫敏組方高劑量Ⅰ組以及氯雷他定組的離體回腸收縮幅度分別為(11.45±0.75)、(29.05±0.35)、(14.75±0.67)、(12.54±0.94)、(12.31±0.61)mm。其中脫敏組方低劑量Ⅰ組、脫敏組方高劑量Ⅰ組、氯雷他定組的收縮幅度值較組胺致敏組降低(t=2.194～3.325，P<0.05), 脫敏組方高劑量Ⅰ組、氯雷他定組的收縮幅度值較脫敏組方低劑量Ⅰ組降低(t=3.780、3.561，P<0.05),脫敏組方高劑量Ⅰ組與氯雷他定組收縮幅度值比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.835，P>0.05)。
2.2 脫敏組方對(duì)Compound 48/80興奮離體回腸收縮幅度的影響
Compound 48/80致敏組、脫敏組方低劑量Ⅱ組、脫敏組方高劑量Ⅱ組及酮替芬組的離體回腸收縮幅度值分別為(31.15±0.65)、(15.01±0.73)、(12.77±0.79)、(12.89±1.16) mm。其中脫敏組方低劑量Ⅱ組、脫敏組方高劑量Ⅱ組以及酮替芬組的收縮幅度值均較Compound 48/80致敏組降低(t=2.314～3.455，P<0.05), 脫敏組方高劑量Ⅱ組、酮替芬組較脫敏組方低劑量Ⅱ組均降低(t=3.169、3.075，P<0.05),脫敏組方高劑量Ⅱ組與酮替芬組比較無(wú)顯著性(t=1.976，P>0.05)。
3 討論
Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)又稱(chēng)Ⅰ型超敏反應(yīng),是IgE 抗體介導(dǎo)的速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，在臨床上比較常見(jiàn)。組胺的受體分型有3類(lèi)：H1和H2受體分布于中樞組胺能神經(jīng)元及外周的胃腸、氣管、子宮、血管平滑肌等組織中，H3受體主要分布于中樞組胺能神經(jīng)元內(nèi)，在外周組織分布密度較低[1]。組胺能引起血管擴(kuò)張，通透性增加[2]。本文結(jié)果顯示，脫敏組方高劑量Ⅰ組對(duì)組胺引起的回腸收縮的抑制作用與氯雷他定組相當(dāng)，脫敏組方低劑量Ⅰ組的作用強(qiáng)度弱于氯雷他定組。說(shuō)明脫敏組方通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合組胺受體，從而拮抗組胺作用于相應(yīng)靶器官所引起的一系列炎癥效應(yīng)，且具有量效依賴(lài)關(guān)系。
Compound 48/80為N?甲氧苯胺和甲醛的縮合物，作為一種非特異性觸發(fā)劑，它作用于細(xì)胞膜上相應(yīng)的受體，通過(guò)改變肥大細(xì)胞膜的通透性或其他機(jī)制誘導(dǎo)組胺等過(guò)敏遞質(zhì)的釋放。本文結(jié)果顯示，脫敏組方高劑量Ⅱ組對(duì)Compound 48/80引起的回腸收縮的抑制作用與酮替芬組相當(dāng)，脫敏組方低劑量Ⅱ組的作用強(qiáng)度弱于酮替芬組。說(shuō)明脫敏組方可以通過(guò)減少非特異性抗原Compound 48/80直接誘導(dǎo)的肥大細(xì)胞釋放組胺來(lái)發(fā)揮抗過(guò)敏反應(yīng)的作用，且具有量效依賴(lài)關(guān)系。
中藥復(fù)方制劑脫敏組方臨床上用于治療蕁麻疹、濕疹等變態(tài)反應(yīng)性皮膚病取得較好的效果。此方中甘草的有效成分甘草甜素有抗過(guò)敏、抑制肥大細(xì)胞脫顆粒的作用,對(duì)補(bǔ)體的兩條激活途徑都有抑制作用。甘草根莖及糖甙有抗乙酰膽堿和組胺的作用,還有糖皮質(zhì)激素樣作用。苦參中的氧化苦參堿具有明顯抑制變應(yīng)原誘導(dǎo)的肥大細(xì)胞脫顆粒作用,能降低細(xì)胞膜的流動(dòng)性,穩(wěn)定細(xì)胞膜。
綜上所述,由這些藥物組成的脫敏方劑具有抗Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的藥理作用，可在臨床上推廣應(yīng)用。
【參考文獻(xiàn)】
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[2]李俠. 三聯(lián)療法治療慢性蕁麻疹86 例臨床分析[J]. 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2007,43(6):544.
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