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化學發光免疫分析方法與應用進展論文
化學發光免疫分析方法與應用進展論文【1】
[摘 要]隨著社會技術的不斷進步，在臨床、環境、食品、藥物檢測等領域不斷地被運用新技術。
化學發光免疫分析法因為其具有選擇性良好、靈敏度較高、分析速度較快而且設備簡單等特點被廣泛的應用。
在實際應用中，進行測定的往往是一些復雜樣品或者是低豐度分析物樣品，而一些經典商品化的免疫分析方法不僅需要消耗的樣品多、而且成本高、周期長，遠不能滿足需求，為此，建立一個低成本、高效率、高靈敏度的免疫檢測方法非常的必要。
化學發光分析方法因為滿足與現實應用的要求，所以獲得了廣泛的發展，本文就化學發光免疫分析方法進行分析，并對其前景進行展望。
[關鍵詞]化學發光免疫分析;免疫傳感;快速檢測
近年來，化學發光免疫分析法備受人們的青睞，主要是因為此方法具有高靈敏度、強特異性、廣適用面和設備簡單等特點。
在臨床醫學、食品藥物等領域，此方法被廣泛應用于抗原與抗體間的識別。
生物分子的體積大、擴散率比較小，所加之對識別微電具有空間阻礙作用，所以受到傳質速率和反應動力學控制的免疫反應速率一般都會比較低。
傳統的免疫分析方法需要的溫育時間比較長，大大限制了樣品測試的通量和適用范圍。
所以為了縮短免疫分析的時間，需要不斷的進行技術創新，從而擴展化學發光免疫分析的應用范圍。
一、化學發光免疫分析法
化學發光分析是一種利用化學反應產生的輻射光的強度來進行物質含量確定的分析方法。
這種分析是化學發光系統和免疫反應的完美結合，主要是利用化學發光的相關物質對抗體或者是抗原進行標記，等到與需要進行測定的抗原或者抗體反應之后，再利用分離游離態化學發光物質的方法，使得加入到化學發光系統中的其他相關物產生化學發光，然后進行抗原或者是抗體的定量或者是定性的檢測。
在化學發光免疫分析中，主要使用4類標記物，分別是異魯米諾及其衍生
物、過氧化物酶和堿性磷酸酶、魯米諾和吖啶酯衍生物。
在目前的化學發光免疫分析法中，以酶為標記物的化學發光是應用的主流。
常用的標記酶是堿性磷酸酶和辣根過氧化物酶。
利用酶來做標記物主要是因為酶具有相應的化學發光底物，在臨床上的應用比較廣泛。
在化學發光免疫分析方法中不可避免的會利用到標記技術，而標記技術是現代免疫分析的關鍵性技術之一。
新的標記免疫分析技術，在目前的社會諸多領域中得到了廣泛的應用，并且展示了非常不錯的發展前景。
在實際標記技術的應用中，納米技術廣泛的用于生物標記，主要是因為納米粒子具有非常良好的生物相容性，而且具有信號放大的效果。
在實際應用中，量子點就是一種半導體納米顆粒，所以在發光免疫分析法中被大量的使用。
二、化學發光免疫分析法的應用
(一) 快速化學發光免疫分析方法
傳統的免疫分析方法需要的時間比較長，而且由于時間的延長往往會導致免疫試劑吸附在管道的內壁上，這樣就會造成不同測定間的信號交叉，對于測定結果的準確度具有嚴重的影響。
為了實現免疫分析的高通量，克服傳統方法的不足，可以通過利用外場的驅動或者是利用溶液來進行有效混合策略，以此來達到加快抗原或者是抗體等大分子的傳質速率。
在實際中，還可以通過提高整個反應體系的溫度來進行免疫反應動力學的加速，這樣也可以實現快速的免疫檢測。
在提高傳質速率的方法選擇上，主要有四種備選方案，分別是改變電滲流、超聲波驅動、電磁攪拌和電場驅動。
通過這種提高傳質速率的方法，可以有效的實現快速檢測，一般在3分鐘之內就可以完成檢測工作。
除去提高傳質速率的方法，外力驅動的加速也會提高檢測，在實際應用中，利用外力驅動的加速效果，可以在16分鐘內完成整個測定分析工作。
(二) 多組分化學發光免疫分析方法
多組分化學發光免疫分析方法也是化學發光免疫分析方法的一種重要應用。
在單個的分析流程中，同時實現多組分的檢測，具有的優勢非常顯著。
利用這種方法，不僅所需要的時間短、樣品的消耗量比較少，而且分析的通量高，分析成本整體較低。
這些優勢都是免疫分析長期追求的目標，也是未來免疫分析的發展研究熱點。
多組分免疫分析模式主要有兩種實踐模式，分別是：多組分同時檢測模式和順序檢測模式。
在實際應用當中，同時檢測模式往往會與空間分辨技術，還有陣列檢測器同時進行結合檢測，而順序檢測一般是在同一個時間期限內對多個組分進行分別檢測。
近年來由于安培免疫傳感器陣列在多組分免疫分析中的廣泛應用，多組分化學發光免疫分析的方法獲得了非常快速的發展。
多組分化學發光免疫分析法的廣泛使用得益于其他技術的長足進步，也就是說多組分化學發光免洗分析的發展要建立在與其相關技術的發展基礎上，所以這種技術在未來的發展潛力巨大。
(三) 高靈敏化學發光免疫分析方法
從過去的實踐經驗中得知，現有的檢測手段其靈敏度和特異性都不是很理想，所以選擇高靈敏度的檢測方法越來越重要。
納米技術快速發展和在檢測中的應用為實現化學發光免疫分析的高靈敏度提供了可能。
就目前的情況而言，納米粒子在生物分析中得到了廣泛的使用，其信號放大的功效對于高靈敏免疫分析方法的構建非常有幫助。
通過研究發現不同粒徑的納米粒子可以增強魯米諾過氧化氫體系的化學發光 ，在試驗中，38 nm 粒徑的納米粒子的增強效果最為顯著。
通過實驗，合成的特殊形狀的不規則金納米粒子，對魯米諾過氧化氫化學發光體系的催化活性是普通納米粒子的100倍。
在試驗中，將抗體固定在不規則金納米粒子表面后發現，會形成夾心免疫復合物，這中復合物對于信號的放大，其效果更加的顯著。
也正是通過試驗得知，將納米粒子廣泛應用于化學發光免疫分析中時，由于其信號放大的效果顯著，測定分析的敏感性和準確度顯著加強。
三、發展與展望
化學發光免疫分析方法在目前的生命科學領域、食品、藥物的測定等方面被廣泛的使用，而且隨著我國對食品安全的重視程度不斷加深，測定范圍和深度肯定會逐漸增加。
化學發光免疫分析方法其本身就具有成本低、操作簡單、靈敏度較高、測定速度快等突出的優勢，在未來的發展中這些優勢會被充分的利用，化學發光免疫分析法的適用范圍也會更加的廣泛。
再者，化學發光免疫分析法與技術的進步有著密切的關系，隨著未來技術的不斷進步，與化學發光免疫分析法相關的技術會得到不斷地改進和發展，這對于化學發光免疫分析法來說，是一個強有力的助推力。
結束語
化學發光免疫分析方法因為其優勢突出所以在目前的各個領域具有非常廣泛的應用。
在實際應用中，一定要不斷的加深對此方法的認識深度，不斷地提高利用此方法的技術，使這種技術更好的為現代的測定工作來服務。
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化學發光免疫分析技術及其應用研究進展【2】
[摘要] 目前化學發光免疫分析技術在醫學以及食品安全檢測中都有著較多的應用，本文主要通過介紹化學發光免疫分析技術的基本原理，來介紹化學發光免疫技術的應用以及化學發光免疫分析技術的研究進展。
[關鍵詞] 化學發光免疫分析技術;研究進展;應用
化學發光免疫分析起源于1977年，化學發光免疫分析主要利用了化學發光測定技術和免疫反應，化學發光測定技術有著非常高的靈敏性同時免疫反應有著非常高的特異性，通過兩者的結合使得化學發光免疫技術成為現今最新的免疫分析技術。
化學發光免疫分析技術較其他免疫分析技術而言擁有著高靈敏度、價格低以及操作簡便等多種優點，正因為這些優點使得化學發光免疫分析技術被廣泛的運用。
1 化學發光免疫分析技術的基本原理
化學發光免疫分析最關鍵的步驟就是化學發光以及免疫，免疫分析技術就是對分析的抗原進行標記，而化學發光分析技術就是對所產生的微觀反應進行檢測，以此來達到分析的目的。
免疫分析就是利用抗原與抗體之間的特異性結合所產生的明顯現象來檢測所檢測物質，而采用標記免疫分析就是通過對抗原進行放射性的標記，這樣就能夠更好的檢測微觀物質所發生的化學反應[1]。
化學發光技術則是化學反應中的一種現象，化學反應必然伴隨著能量的遷移，而具備能量的分子為了達到穩定的狀態就要釋放多余的能量，能量則是通過光形式釋放出來，對所發出的光和能量遷移進行分析便可以知道內部所發生的化學變化。
2 化學發光免疫分析技術的應用
由于化學發光免疫分析技術不僅擁有較好的靈敏度以及較高的自動化程度，而且其還有較高的精密程度，所以得到了較多的應用。
化學發光免疫分析技術在獸醫學、臨床醫學以及食品分析中都得到了相當多的應用，下面將進行詳細介紹。
2.1 化學發光免疫分析技術在獸醫學中的應用 化學發光免疫分析技術在獸醫學中的應用還處于早期階段，因此沒有得到較多的應用。
主要原因則是化學發光免疫分析技術在獸醫學的應用中會跨越化學、獸醫以及生物學科方面的知識，而這樣加大了化學發光免疫分析技術的應用難度，因此沒有在獸醫學中得到較多的應用。
但是化學發光免疫分析技術仍然是獸醫學中一項疾病快速檢測的方法，即通過化學發光免疫分析技術可以精準快速的判定動物所發生疾病的原因，而且通過這項技術的運用還可以監測動物體內的疾病發生概率[2]。
化學發光免疫分析技術在我國沒有較多的應用到獸醫學中，而且技術也沒有國外先進，這進一步制約了化學發光免疫分析技術在我國的應用。
國外化學發光免疫分析技術在獸醫學中的應用較多，比如國外利用化學發光免疫分析技術來進行動物腸道病毒檢測試驗、豬肉中沙門菌抗體檢測以及評價胰島素濃度對奶牛繁殖性能的影響，并且取得了較好的成果。
2.2 化學發光免疫分析技術在臨床醫學中的應用 化學發光免疫分析技術在臨床醫學中有較多的應用，比在獸醫學中的應用要更加廣泛，而且在臨床醫學的應用中非常重要。
美國通過對化學發光免疫分析技術進行改進，使得其具備更好的靈敏性以及精準性，現今化學發光免疫分析技術在臨床醫學中主要用來檢測甲狀腺系統、性腺系統、血液系統以及心血管系統中激素濃度。
后來有科學家利用金剛烷衍生物在堿性磷酸酶的條件下可產生長時間輝光的特性將其運用到化學發光免疫分析技術中，即通過堿性磷酸酶來作為標記物，完善后的化學發光免疫分析技術科用來檢測心臟病、傳染病、糖尿病以及過敏癥狀，另外還可以用于血液系統和胰島素的檢測中。
現今將化學發光免疫分析技術運用的最好的就是Roche公司，其所創造的ECL分析系統可以檢測到及其細微的反應信號，并且特異性反應極為強烈，操作過程也非常快捷。
2.3 化學發光免疫分析技術在食品分析上中的應用 現今食品安全已成為人們越來越關注的問題，檢測食品中含有的違規成分也有一定的難度。
但是通過化學發光免疫分析技術的運用可以快速精確的測定食品中違規成分的含量，使得食品檢測部門可以更好的測定食品中含有成分的含量。
化學發光免疫分析技術可以用于雞肉樣品中CAP的檢測以及牛奶中黃曲霉毒素的檢測，國外科學家還利用化學發光免疫分析技術來測定牛奶、牛肉以及雞蛋中肉毒梭菌毒素A的含量，由于化學發光免疫分析技術有著較高的靈敏度，所以所測定的結果非常準確，而且極大的節省了測試所需要的時間[3]。
Yang M等科學家將增強型化學發光免疫檢測技術以及電荷耦合器件結合起來創造了檢測食品中葡萄球菌腸毒素B的技術，其靈敏度非常高、方法實用而且檢測成本非常低。
3 化學發光免疫分析技術的新研究進展
3.1 新的標記物 化學發光免疫分析技術運用的重點就是檢測內部微觀化學反應的情況，而為了達到更好的檢測效果就需要發光物質發光時間更加持久發光更加明亮，而這可以通過標記新的標記物來得以實現。
各國科學家都致力于研究標記物的發光時間以及發光強度，標記物發光需要特定酶的催化，這需要科學家通過長時間的實踐才能夠證明哪一種標記物在哪一種酶的催化下才能夠達到長時間的發光以及高強度的發光，另外對于標記物發光過程還需要較高的穩定性。
目前科學家通過大量實驗得到luminol-H2O2在HRP2A的催化下可以發出高強度而且長時間的光，而且發光的穩定性非常好。
化學發光免疫分析技術能夠快速、靈敏、精準的測定非常細微的物質含量，對于醫學檢測以及食品安全檢測都有著較多的應用，通過不斷的研究會使得該技術得到更廣泛的運用。
參考文獻
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