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膽結石的形成機理及成分分析論文
摘 要:膽結石是臨床常見病、多發病。人體膽結石的成份非常復雜,膽結石的主要成分為膽固醇和膽紅素。了解膽結石的成因和發病機理,將引導我們找到治療膽結石的科學方法。膽結石的成分分析,是有效治療膽結石的重要前提。
關鍵詞:膽結石 發病機理 定性分析 定量分析
引言
近年來應用紅外光譜法結合化學分析方法將膽結石進行分類,找出快速鑒定膽石類型的途徑,以便對癥治療,在臨床的應用越來越普遍。現代的傅立葉變換紅外光譜法有快速、分辨率高等優點,可用于膽結石的分類和快速檢定分析。
1 膽結石的分類
按結石發生部位不同,分為膽囊結石、肝內膽管結石、膽總管結石[2]。按結石化學成分不同,通常包括膽固醇結石、膽色素結石或二者的混合物,即混合型結石。
1.1 膽固醇結石
外觀呈白色,通常是圓形或卵圓形,表面光滑或呈顆粒狀。此類結石多發生在膽囊內,由于膽固醇結石的發生與代謝有關系,故又稱之為代謝性結石。
1.2 膽色素結石
多數以膽紅素鈣為主。其中黑色素結石的外觀不定型、表面光滑、質地堅硬,主要成分是色素聚合物、硫酸鈣、磷酸鈣,多發于膽囊內[4];膽色素鈣常呈棕黃色小顆粒狀,質地松軟,主要成分是膽固醇、膽色素鈣、脂肪酸鈣,多發生于膽管內。
1.3 混合性結石
主要成分也是膽固醇、膽色素、鈣鹽,其外形呈多面角形,表面光滑,呈深綠色或棕黃色顆粒,往往數目較多,排列整齊,其切面多呈環層狀,亦多發生于膽囊內。
2 膽結石的主要成分
人體膽結石的成分非常復雜,膽結石的主要成分為膽固醇和膽紅素,此外還含有磷脂、蛋白、膽酸、游離脂肪酸及鈣、鎂等無機元素[3]。根據其膽固醇和膽紅素含量不同,膽石可分為膽固醇型及膽色素型等不同類型。
3 膽結石的成因及發病機理
人體內大量的膽固醇來源于各組織的形成,只有小部分是來源于食物中。形成膽固醇結石的主要物質基礎是膽汁的過量飽和。假如膽汁內含有過高的膽固醇,膽汁就會很黏稠,長期留在膽囊內沉淀成硬塊而形成膽結石[6]。
肝膽對膽固醇的合成越多,膽固醇變成膽汁酸的速度就越慢,這樣膽固醇太過于飽和,就會與膽汁酸比例失調。這種狀態持續下去會發生阻塞性黃疸,過量的膽汁酸進入人體,通過體內循環,膽汁酸會增多,就會有過多的膽汁酸排除體外,從而造成腸肝循環減慢,膽固醇的溶存度也因此而降低。濃縮的膽汁,由于很黏稠,排除受到極大阻礙,長時間淤積在一起,膽汁成分比例就開始失常。由于膽固醇含量高容易在膽囊粘膜上沉積,影響膽囊中黏蛋白的分泌,黏蛋白可以把膽固醇結晶和膽紅素鈣較強地黏合在一起,更易于形成膽結石[1]。
4 膽結石成分的定性分析
4.1 化學分析法
膽結石中的膽固醇及膽紅素對特定的化學試劑有不同的顏色反應,利用反應后的顏色深淺或其他變化來大致檢測膽同醇和膽紅素的含量對膽結石進行分類,方法簡易快速、結果可靠,適于一般臨床工作中的膽結石快速分類。
4.2 紅外光譜法
膽結石的主要成分膽固醇和膽紅素都有非常特征的紅外光譜,用紅外光譜法很容易鑒別。紅外光譜似化合物的指紋,可不改變混合物的體系組成進行成分分析。而膽結石未加分離情況下的紅外光譜是膽結石內各成分吸收峰的機械疊加,根據吸收峰的峰位、強度、形狀與標準品紅外光譜圖或對照圖譜比較,即可判斷膽結石的主要成分。
4.3 電子自旋共振譜(ESR或EPR)分析法
鑒于膽結石中含有的過渡金屬離子及膽色素類組分都可能有ESR信號,有人做了膽結石ESR譜的初步研究,表明色素型結石有其獨特的ESR譜,而膽固醇型結石中的膽紅素類物質和過渡金屬離子含量都很少,因而這類膽結石沒有或只有很弱的ESR信號,故ESR譜可用來區別膽結石類型[3]。
5 膽結石成分的定量分析
5.1 膽結石中膽固醇含量測定[2]
5.1.1 化學法
用乙醚從膽結石中提取出膽固醇,蒸干后加無水乙醇溶解,加入硫酸鐵顯色劑,膽固醇與三價鐵形成紫紅色化合物,550 nm波長下比色法測定,與同樣處理之標準品比較,即可求得膽結石中膽固醇的含量。
5.1.2 薄層掃描法
膽結石粉末用氯仿一無水乙醇(35:15)另加1滴濃鹽酸溶解后,在高效硅膠薄層板上點樣,以二甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(1.6:0.2:0.1)作展開劑,用50% 硫酸乙醇液顯色后于薄層掃描儀上掃描。
5.1.3 傅立葉變換紅外光譜法
在有機化合物儀器分析中,應用紅外光譜分析方法的特點,可進行各種氣體、液體和固體的定量分析 。應用紅外光譜技術對膽結石進行定性、定量分析,可不經分離而直接測定,亦可避免加入其他化學物質的影響。
5.2 膽結石中膽紅素含量測定
5.2.1 重氮化法
膽結石中的膽紅素經鹽酸浸泡后,才能被氯仿溶解而提取出來,被提取出來的膽紅素與歐立區重氮試劑偶氮化,形成偶氮膽紅素,呈紅色,溶于甲醇中,于540 nm波長處比色測定,與同樣處理的標準管比較.即可求得膽結石中膽紅素的含量 。
5.2.2 分光光度法
該法采用醋酸-氯仿(1:4)為溶媒,把膽結石直接溶解即可得透明液,在453 nm波長處測定吸收度。結果表明本法線性關系良好,精密度、回收率和穩定性也都令人滿意,且方法較重氮化法更為簡便易行。
5.2.3 傅立葉變換紅外光譜法
前面已提到應用紅外光譜法可根據膽結石中各種分離成分的特征進行定性,對于定量分析可選取不相干擾的特征峰或干擾小的特征峰進行測定。
參考文獻
[1]宋薏芳等.傅立葉變換紅外光譜技術及應用研討會論文集(-),海洋出版社,1993,102-110
[2]張洪昌等.膽紅索,膽素生產技術.科學技術文獻出版社出版.1998(10)
[3]王君,韓建濤,張揚. 膽結石治療方法研究的現狀與展望[J]. 右江醫學,2002,30(6):521-522.
[4]吉毅崢,簡文豪,劉英棣. 膽結石直接溶石術的現狀和進展[J]. 中華超聲影像學雜志,2002,11(2):117-119.
[5]李晶石,杜麗絹. 膽結石溶石治療[J]. 吉林醫學院學報,1999,199(1)
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