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血吸蟲病的免疫學檢驗方法
血吸蟲病的免疫學檢驗方法
摘要：目的：探討分析血吸蟲病的免疫學檢驗方法。
方法：對目前較為常用的4種血吸蟲病的免疫學檢驗方法進行對比，4種方法分別為皮內試驗、環卵沉淀試驗、酶聯免疫法和間接凝血試驗，對比4種方法檢驗的敏感性和各自的優勢和劣勢。
結果：我們的試驗結果顯示4種方法檢測血吸蟲病的陽性率分別為皮內試驗94.30%、環卵沉淀試驗96.80%、酶聯免疫法98.10%、間接血凝試驗92.70%，4種方法的陽性率進行比較發現差異不明顯，P>0.05，不具有統計學意義。
結論：4種方法都具有較高的檢查敏感性，但又各具特點，在實際應用中應該靈活結合努力發揮每種方法最大的優勢，使其為臨床診斷提供更為可靠和準確的結果。
關鍵詞：血吸蟲病免疫學檢驗陽性率臨床診斷
血吸蟲病是一種嚴重的寄生蟲病對人體危害極大，血吸蟲的傳染源為哺乳類動物，常見的感染情況為人畜共患。
感染人群一般都是接觸了被污染的疫水、土壤、食物等進而患病[1]。
病蟲感染宿主后通常會有一段潛伏期，因而臨床及時有效的診斷是提高患者治愈率的關鍵。
感染后患者常會出現咳嗽、咯血、發熱、嗜酸性粒細胞增加等癥狀，如果患者靜脈壁受損還可能發生血栓。
臨床診斷時醫生除了觀察患者的具體癥狀，還要結合實驗室檢測、免疫學檢測、超聲檢測等結果做出最終判斷[2]。
我們對目前較為流行的4種血吸蟲病的免疫學檢驗方法(皮內試驗、環卵沉淀試驗、酶聯免疫法和間接凝血試驗)進行對比分析，現將結果報道如下。
1資料和方法
1.1背景資料。
選取成熟血吸蟲的蟲卵作為研究對象，由于蟲卵內部毛蚴的分泌排泄物抗原性較強，因而可以和血吸蟲宿主的血清相作用進而形成特異性的沉淀物質。
1.2試驗方法。
對目前較為常用的4種血吸蟲病的免疫學檢驗方法進行對比，4種方法分別為皮內試驗、環卵沉淀試驗、酶聯免疫法和間接凝血試驗，具體試驗方法如下。
1.2.1皮內試驗。
按照1∶3000的比例制備新鮮成蟲勻漿，使用無菌注射器和皮試針頭對受試者進行皮試注射，注射劑量為0.05ml。
注射完畢后等待15分鐘觀察結果，具體為檢查受試者的注射部位是否出現丘疹，如果出現要測量其最大直徑，最大直徑大于或等于1.0cm的為陽性反應。
1.2.2環卵沉淀試驗。
抽取受試者的血液樣本進行離心處理獲得血清，用融化的石蠟在干凈的載玻片上劃2道間距約為20mm的直線，待石蠟干燥后在2道線間滴加2滴受試者的血清。
然后再向血清中加入約100個干燥的蟲卵混勻，覆上蓋玻片并用石蠟密封四周。
將玻片置于溫箱中培育48小時后在顯微鏡下觀察結果。
根據蟲卵周圍出現的沉淀物的大小進行陽性判斷。
1.2.3酶聯免疫法。
首先制備實驗組，使用日本血吸蟲可溶性蟲卵粗抗原(1∶3000)包被聚苯乙烯板，在4℃的溫箱內過夜培育，第二天進行沖洗再加入受試者的血清樣本(1∶200，吐溫-PBS稀釋)，按照同樣的方法制備對照組，對照組不加血清樣本。
最后向實驗組和對照組中加入底物進行顯色處理，并使用酶標比色計讀取吸光度值。
1.2.4間接凝血試驗。
先在U型微量血凝板的第一排的第一孔、第二孔、第三孔和第四孔內分別滴加0.9%的氯化鈉溶液，再向第一孔加入血清樣本混勻，對第二、三、四孔依次根據遞減稀釋法進行滴加。
在第三孔和第四孔內加入稀釋后的致敏紅細胞懸液，旋轉震搖混勻后在室溫下靜置1小時后觀察記錄結果。
根據四個孔內的陽性反應情況判斷是否為血吸蟲病患者。
1.3統計學方法。
使用SPSS19.0對所有數據進行處理，統計分析方法使用卡方檢驗和ANOVA，P<0.05，為差異統計學顯著。
2結果
我們的試驗結果顯示4種方法檢測血吸蟲病的陽性率分別為皮內試驗94.30%、環卵沉淀試驗96.80%、酶聯免疫法98.10%、間接血凝試驗92.70%，見表1。
對皮內試驗、環卵沉淀試驗、酶聯免疫法和間接凝血試驗的陽性率進行比較發現差異不明顯，P>0.05，不具有統計學意義。
3討論
血吸蟲病是一種嚴重的寄生蟲類疾病，根據世界衛生組織1995年的統計數據顯示，全球受該病威脅的人口達6億多，其中感染人口接近2億。
可以感染人體的血吸蟲主要為曼氏血吸蟲、埃及血吸蟲、日本血吸蟲、間插血吸蟲、湄公血吸蟲和馬來血吸蟲等，我國是該病的高發區域，發病人群主要集中在長江流域和南方一些地區[2]。
血吸蟲的傳染源為哺乳類動物，常見的感染情況為人畜共患，多種因素都可以影響血吸蟲病的流行，如氣溫、水源、土壤、人口流動、社會制度等。
一般而言，感染人群都是接觸了被污染的疫水、土壤、食物等進而患病。
感染后患者常會出現咳嗽、咯血、發熱、嗜酸性粒細胞增加等癥狀，如果患者靜脈壁受損還可能發生血栓。
臨床診斷時醫生除了觀察患者的具體癥狀，還要結合實驗室檢測、免疫學檢測、超聲檢測等結果做出最終判斷[3]。
對血吸蟲病的免疫學檢測通常采用血吸蟲尾蚴和蟲卵制備抗原，目前較為常見的方法包括皮內試驗、環卵沉淀試驗、酶聯免疫法、間接血凝試驗4種方法。
我們對4種方法的陽性率進行對比，結果發現差異不明顯，4種方法的陽性率均可達90%以上，說明都具有較高的敏感性[4]。
臨床通常使用皮內試驗進行普通過篩，對出現陽性的可疑人群進一步檢查。
這種方法還可以用于檢查低齡人群是否出現新的感染以考核防治的效果。
皮內試驗對肺吸蟲有部分的交叉反應。
該法也不適用于藥物療效的考核，因為患者在治愈后的較長時間內仍會顯示陽性反應。
對于治愈患者使用環卵沉淀反應進行檢測會發現反應強度逐漸減弱，因而可以考核療效。
環卵沉淀反應對絲蟲病、肺吸蟲等患者的血清有較強的交叉反應。
這種方法常被用于流行疫區治療效果的評價。
酶聯免疫法的檢測優勢在于和一般常見的寄生蟲沒有明顯的交叉反應。
間接血凝試驗也可以反映治愈患者的血清變化情況，但是由陽性轉陰的速度比較緩慢，該法對肺吸蟲患者的血清也有部分交叉反應[5]。
由此可見4種方法都具有較高的檢查敏感性，但又各具特點，在實際應用中應該靈活結合努力發揮每種方法最大的優勢，使其為臨床診斷提供更為可靠和準確的結果。
參考文獻
[1]張興翔.血吸蟲病的免疫學檢驗方法分析[J].中國當代醫藥，2010，30(11)：70-73
[2]樊寧，孫福生.免疫學檢驗方法的進展和應用[J].醫學綜述，2011，07(09)：1063-1066
[3]陳紹榮，陳鳳，周曉農，李宏軍，PeterJacobSteinmann，楊忠，李遠林.病原學和血清學檢驗方法在大山區血吸蟲病流行區的應用[J].寄生蟲病與感染性疾病，2007，01(05)：1-4
[4]車宏莉.日本血吸蟲病免疫傳感技術檢測方法的研究[D].中南大學，2008，09(12)：11-15
[5]管曉虹，石佑恩.評估日本血吸蟲病免疫學診斷方法療效考核價值的合作研究[J].中國血吸蟲病防治雜志，1996，02(07)：72-78
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